Services offerts et clientèles
Mise en place grâce au support de la Fondation Charles-Bruneau, la Plateforme de reprogrammation de cellules et d'édition de gènes offre un soutien technologique et scientifique hautement spécialisé à la communauté de chercheurs du CHU Sainte-Justine et d’autres établissements, ainsi qu'à des collaborateurs et clients externes qui voudraient utiliser les méthodes de reprogrammation et de modification du génome dans leurs projets de recherche.
Édition de gènes
- Design et insertion de 3 gRNAs dans un vecteur d’expression lentiviral (i.e. lentiGuide-Puro)
- Séquençage
- Production de particules virales
- Mismatch assay (type Surveyor)
À noter que nous ne pouvons pas garantir une efficacité de clivage puisque cette dernière est dépendante de l’efficacité de transfection/transduction de la lignée cellulaire d’intérêt.
- Tri cellulaire si le phénotype le permet ou isolation clonale si nécessaire
Prévoir une période de 4-6 semaines
Reprogrammation
- Génération de 2 clones iPSC à partir de l’échantillon biologique du demandeur;
- fibroblastes de peau
- échantillon de sang frais ou congelé (minimum 5 ml)
- lignée lymphoblastoide (lymphocyte B immortalisé par le virus EBV)
- Caractérisation par immunofluorescence
- marqueur SSEA4 et Tra1-60
- Formation de tératomes chez la souris NSG
Prévoir une période de 3-4 mois
Pour de plus amples renseignements sur les infrastructures et les plateformes technologiques du Centre de cancérologie charles-bruneau, consultez l'intranet.
Formation
Au besoin, une formation de base d’une durée d’environ 2 heures sur la culture des cellules iPS est offerte gratuitement aux utilisateurs de la plateforme. Pour prendre rendez-vous, contacter un gestionnaire.
Contacts
Christian Beauséjour, PhD
Directeur de la plateforme
c.beausejour@umontreal.ca
Romain Gioia, PhD
Gestionnaire – Édition du génome
romaingioia1@gmail.com
Basma Benabdallah, PhD
Gestionnaire – Reprogrammation cellulaire
basma.benabdallah@gmail.com