La mission de la Plateforme de reprogrammation de cellules - iPSC est d’offrir des consultations, des formations et du soutien technologique et scientifique hautement spécialisé à la communauté de chercheuses et chercheurs du CHU Sainte-Justine et d’autres établissements, ainsi qu'à des collaboratrices et collaborateurs et clientèles externes qui souhaiteraient utiliser les méthodes de reprogrammation cellulaire dans leurs projets de recherche.
Les cellules souches pluripotentes (iPSC) ont été découvertes en 2006 chez la souris et en 2012 à partir de cellules somatiques humaines. Elles sont générées suite à l’introduction de quatre facteurs de transcription et ont la capacité de se multiplier indéfiniment mais aussi de se différencier en tout type cellulaire de l’organisme. Les iPSC peuvent être produites sans aucune limite en quantité ce qui leur confère un grand potentiel dans la modélisation de plusieurs pathologies, le développement de molécules thérapeutiques ainsi que tous les tests de toxicité et d’efficacité qui y sont reliés. Les iPSC constituent aussi un bon outil potentiel pour la médecine régénérative basée sur le remplacement de cellules pathologiques par des cellules saines.
De plus, la combinaison de la technologie des iPSC et de l’édition de gènes (utilisant divers systèmes dont le CRISPR-Cas9) permet en autres la création de cellules pathologiques qui seraient difficiles d’accès directement à partir d'une patiente ou d'un patient et aussi à l’inverse des cellules contrôles isogéniques aux cellules iPSC dérivées de patientes et patients.
Services offerts
- Reprogrammation de cellules somatiques (fibroblastes ou cellules de sang périphérique) ou lignées immortalisées en cellules souches pluripotentes induites (iPSC)
- Génération de 4 clones iPSC individuels par lignée
- Caractérisation des iPSC générées par immunofluorescence pour les marqueurs de pluripotence (SSEA4, Tra1-60, Sox2- OCT4)
- Criblage de la mutation sur les clones d’iPSC générés par séquençage (sur les cellules de patientes et patients avec une mutation rapportée seulement)
- Détection par RT-PCR du SeV
- Analyses par qPCR pour la détection de la majorité des anomalies du caryotype rapportées dans les iPSC
- Différenciation dirigée des iPSC vers l’ecto-, le méso- et l’endoderme et leur caractérisation
- Caryotype par les Bandes-G (fait par Cell Line Genetics)
- Différenciation des iPSC en différents types cellulaires et leur caractérisation incluant les cellules progénitrices pulmonaires, neurales, endothéliales, hépatiques fibroblastes et myoblastes (une consultation au préalable est nécessaire pour l’établissement d’un budget estimé)
Équipements
- Kit de reprogrammation CytoTune™-iPS 2.0 Sendai (Life Technologies)
- Plasmides de reprogrammation OCT3/4, Sox2-KLF4 et Lin28-c-Myc (Addgene)
- Kit de reprogrammation mARN OCT4, KLF-4, SOX2, GLIS1, et c-MYC (STEMCELL technologies
- StemMACS iPSC mRNA kit (Miltenyi)
- Lignées contrôles d’iPSC issues de fibroblastes ou de cellules de sang périphérique
- Différents anticorps pour détecter les principaux marqueurs de pluripotence ainsi que certains marqueurs spécifiques de différenciation
- Kit de différenciation trilinéage (Miltenyi/STEMCELL technologies)
- Kits de différenciation cellulaire type-spécifique (STEMCELL technologies, Life Technologies, Lonza)
- Multiple facteurs et cytokines nécessaires pour initier diverses différenciations spécifiques
- Kit de nucléofection de cellules souches humaines et fibroblastes humains (Lonza)
Demande de service
Veuillez communiquer avec la responsable de la plateforme afin d'organiser une brève consultation visant à discuter de votre projet et faire préparer une soumission personnalisée basée sur vos besoins spécifiques en reprogrammation de cellules.
Aperçu
Équipe
Responsable
Basma Benabdallah, Ph.D.
+1 (514) 345-4931, poste 6531
basma.benabdallah.hsj@ssss.gouv.qc.ca
Directeur scientifique
Nicolas Dumont, PhD
+1 (514) 345-4931, poste 7876
nicolas.dumont.hsj@ssss.gouv.qc.ca
Co-directeur scientifique
Anthony Flamier, PhD
+1 (514) 345-4931, poste 7627
anthony.flamier.hsj@ssss.gouv.qc.ca
Assistante de recherche
Sylvie Pinto, M.Sc
+1 (514) 345-4931, poste 7618
sylvie.pinto.hsj@ssss.gouv.qc.ca
Assistante de recherche
Célia Kassouri, M.Sc
+1 (514) 345-4931, poste 7618
celia.kassouri.hsj@ssss.gouv.qc.ca
Responsable des plateformes scientifiques
Valérie Villeneuve, PhD
+1 (514) 345-4931, poste 2786
valerie.villeneuve.hsj@ssss.gouv.qc.ca
Partenaires financiers
- Fondation Charles-Bruneau
- Canadien Pacifique
- Réseau de thérapie cellulaire, tissulaire et génique du Québec (ThéCell)
- Conseil national de recherche du Canada (CNRC)
- Fondation Azrieli