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Reprogrammation de cellules

Plateforme de reprogrammation de cellules iPSC

Plateforme de reprogrammation des cellules

La mission de la Plateforme de reprogrammation de cellules iPSC est d’offrir des consultations, des formations et du soutien technologique et scientifique hautement spécialisé à la communauté de chercheuses et chercheurs du CHU Sainte-Justine et d’autres établissements, ainsi qu'à des collaboratrices et collaborateurs et clientèles externes qui souhaiteraient utiliser les méthodes de reprogrammation cellulaire dans leurs projets de recherche.

Les cellules souches pluripotentes (iPSC) ont été découverte en 2006 chez la souris et en 2012 à partir de cellules somatiques humaines. Elles sont générées suite à l’introduction de quatre facteurs de transcription et ont la capacité de se multiplier indéfiniment mais aussi de se différencier en tout type cellulaire de l’organisme. Les iPSC peuvent être produites sans aucune limite en quantité ce qui leur confère un grand potentiel dans la modélisation de plusieurs pathologies, le développement de molécules thérapeutiques ainsi que tous les tests de toxicité et d’efficacité qui y sont reliés. Les iPSC constituent aussi un bon outil potentiel pour la médecine régénérative basée sur le remplacement de cellules pathologiques par des cellules saines.

De plus, la combinaison de la technologie des iPSC et de l’édition de gènes (utilisant divers systèmes dont le CRISPR-Cas9) permet en autres la création de cellules pathologiques qui serait difficiles d’accès directement à partir du patient et aussi à l’inverse des cellules contrôles isogéniques aux cellules iPSC dérivées de patientes et patients.

Services offerts

  • Reprogrammation de cellules somatiques (fibroblastes ou cellules de sang périphérique) ou lignées immortalisées en cellules souches pluripotentes induites (iPSC)
  • Génération de 2 clones iPSC par lignée
  • Caractérisation des iPSC générées par immunofluorescence pour les marqueurs de pluripotence (SSEA4, Tra1-60, Sox2- OCT4)
  • Criblage de la mutation sur les clones d’iPSC générés par séquençage (sur les cellules de patients avec une mutation rapportée seulement)
  • Caractérisation des iPSC générées in vivo par la formation de tératomes chez la souris immunodéficiente NSG (2 souris par clone)
  • Analyses par RT-PCR pour la clairance du SeV
  • Analyses par qPCR pour la détéction de la majorité des anomalies du karyotype rapportées dans les iPSC
  • Différenciation dirigée des iPSC vers l’ecto-, le méso- et l’endoderme et leur caractérisation
  • Caryotype par les Bandes-G (fait par le département de cytogénétique du CHUSJ)
  • Formation de corps embryonnaires (EB)
  • Différenciation des iPSC en différents types cellulaires et leur caractérisation incluant les cellules progénitrices pulmonaires, neurales, endothéliales, hépatiques fibroblastes et myoblastes (une consultation au préalable est nécessaire pour l’établissement d’un budget estimé)

Équipements

  • Kit de reprogrammation CytoTune™-iPS 2.0 Sendai (Life Technologies)
  • Plasmides de reprogrammation (Addgene)
  • Lignées contrôles d’iPSC issues de fibroblastes ou de cellules de sang périphérique
  • Différents anticorps pour détecter les principaux marqueurs de pluripotence ainsi que certains marqueurs spécifiques de différenciation
  • Kit de différenciation trilinéage (Miltenyi)
  • Kits de différenciation cellulaire type-spécifique (STEMCELL technologies, Life Technologies)
  • Multiple facteurs et cytokines nécessaires pour initier diverses différenciations spécifiques
  • Kit de nucleofection de cellules souches humaines (Lonza)

Demande de service

Veuillez remplir le formulaire de réquisition rapide pour toute demande et le retourner au responsable de la plateforme. Vous serez contacté par la suite pour organiser une brève consultation afin de discuter de votre projet et faire préparer une soumission personnalisée basée sur vos besoins spécifiques en reprogrammation de cellules.

Aperçu

Aperçu des services

Équipe

Responsable
Basma Benabdallah, Ph.D.
+1 (514) 345-4931, poste 6531
basma.benabdallah.hsj@ssss.gouv.qc.ca

Directeur scientifique
Christian Beauséjour, Ph.D.
+1 (514) 345-4931, poste 4385
christian.beausejour.hsj@ssss.gouv.qc.ca

Assistante de recherche
Sylvie Pinto, M.Sc
+1 (514) 345-4931, poste 7618
sylvie.pinto.hsj@ssss.gouv.qc.ca

Assistante de recherche
Célia Kassouri, M.Sc
+1 (514) 345-4931, poste 7618
celia.kassouri.hsj@ssss.gouv.qc.ca

Chef des plateformes scientifiques
Valérie Villeneuve, Ph.D.
+1 (514) 345-4931, poste 2786
valerie.villeneuve.hsj@ssss.gouv.qc.ca

Partenaires Financiers

  • Fondation Charles-Bruneau
  • Canadien Pacifique
  • Réseau de thérapie cellulaire, tissulaire et génique du Québec (ThéCell)
  • Conseil national de recherche du Canada (CNRC)
  • Hôpital SickKids
À propos de cette page
Mise à jour le 11 septembre 2023
Créée le 23 septembre 2016
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